İnsan lösemi (HL-60) hücre dizisinde piridin 2- karbaldoksim ligandı ve PT (II) kompleksinin apoptotik etkilerinin araştırılması

Abstract

Sisplatin, sisplatinyum ya da cis-diamindikloroplatinyum(II) (CDDP), lenfomalar, bazı karsinomlar, sarkomalar dahil pek çok kanser tipinde kullanılan platin kökenli bir kemoterapi ilacıdır. Karboplatin ve oksaliplatinin de dahil olduğu anti-kanser ilaçlarının ilk üyelerindendir. Bu platin kompleksleri, DNA ile çapraz bağlantılar yaparak, apoptozisi tetiklemektedir. Akut miyelositik lösemi, (AML), lösemik öncül hücrelerin (miyeloid), kontrolsüz olarak çoğalmalarının yanı sıra olgunlasma ve farklılasma özelliklerini kaybetmeleri ile ortaya çıkmaktadır. Biz bu çalısmada, insan lösemi HL-60 hücre dizisinde, piridin-2- karbaldoksim ligandı ve Pt (II) kompleksinin sitotoksik ve apoptotik etkilerini sisplatinle karsılastırmalı olarak arastırmayı amaçladık. Sitotoksik etki MTT, apoptotik etki de flow sitometrik ve DNA fragmantasyon yöntemleri kullanılarak arastırılmıstır. Kültür ortamında çoğaltılan insan HL-60 hücrelerine sisplatin, piridin-2-karbaldoksim ligandı ve Pt (II) Kompleksi’nin 5, 10, 25, 50, 100 ?M konsantrasyonları uygulanmıs ve 24, 48 ve 72. saatlerdeki sitotoksik etkileri belirlenmistir. ApopNexinTM FITC apoptozis belirleme kiti kullanılarak, flow sitometri cihazında 25, 50, 100 ?M sisplatin, piridin-2-karbaldoksim ligandı ve Pt(II) Kompleksi konsantrasyonlarının, HL-60 hücrelerinde 24 saatlik apoptotik etkileri değerlendirilmistir. Yine sisplatin, piridin-2-karbaldoksim ligandı ve Pt (II) Kompleksi’nin 5, 10, 25, 50, 100 ?M konsantrasyonlarının HL-60 hücrelerinde, 24 saatlik inkübasyon sonrası apoptotik etkileri, agaroz jel DNA fragmantasyon yöntemi ile arastırılmıstır. Sonuç olarak bu çalısmada, sisplatin ve platin (II) kompleksi konsantrasyon ve zamana bağlı olarak HL60 hücrelerinde sitotoksik etki göstermistir. Flow sitometri ve agaroz jel fragmantasyonu sonuçlarına göre, sisplatin, piridin-2- karbaldoksim ligandı ve Pt (II) kompleksinin HL60 hücrelerinin 24 saatlik inkübasyonu sonunda, önemli bir apoptotik etki belirlenmemis olup nekrotik hücre ölüm mekanizmasının apoptoza göre daha fazla kullanıldığı görülmüstür.