Freeze-Substitution: Its Application and Some Basic Principles

Abstract

An electron micrograph contains more information than any other imaging technique at high resolution. Therefore the goal of electron microscopist to image these details as realistic, as life-like as possible. During this quest many preparation-induced changes were discovered and openly discussed, which led to the negative reputation that electron microscopy only images artefacts. On the other hand it should be pointed-out that in the last decades, thanks to cryo-applications, the preparation methods have progressed so much that preparation artefacts are minimised and well understood. In this overview I sketch the present state of preparation methods for biological applications with attention to im-munolabelling and electron tomography.

Elektron Mikroskobik görüntüler diğer yüksek çözünürlüklü görüntüleme tekniklerine göre daha çok bilgi vermektedir. Elektron mikroskobistlerin amacı bu detayları canlı haline en yakın görüntüli-yebilmektir. Pek çok preperasyon teknikleri keşfedilmiştir ve bu tekniklerle hala tartışmaya açık olan görüntülerdeki artefaktlardır. Diğer yandan son yüzyılda kryo uygulamalarına teşekkür etmeliyiz, bu preperasyon metodu ile artefaktlar çok azaltılmış ve iyi anlaşılabilmiştir. Burada biyolojik uygulamalarda halen kullanılan immün işaretleme ve elektron tomografi teknikleri ele alınmıştır.