Protoplast Füzyonu ile Origanum Onites ve Origanum Majorana Arasında Somatik Hibritlerin Eldesi ve Bunların Moleküler Analizle Onaylanması

Abstract

Daha fazla kekik yağı üretebileceğimiz yeni bir kekik türü elde etmek için Origanum onites (bilyalı kekik) ve Origanum majorana ( beyaz kekik ) türleri arasında protoplast füzyonu yapılmıştır. Protoplastların izolasyonunda CPW + mannitol ve CPW + sukroz karışımı, oluşan protoplastları füzyon ile karıştırmak için CPW + enzim çözeltisi ( % 20 selülaz, % 30 driselaz, % 15 pektinaz, % 10 polietilen - glikol ( PEG ) kullanılarak başarı sağlanmıştır. Bir ay sonra kallus hücreleri oluşmuştur. Sibrit hücre grubunun gerçek hibrit olup olmadığını saptamak için iki kekik bitkisinden ve sibrit hücre grubundan DNA izole edilmiş ve RAPD - PZR analizi yapılmıştır. İki türe ait spesifik DNA bantları sibrid hücre grubunda tespit edilmiştir. Bu sonuç, protoplast füzyonu sonrasında oluşan sibritlerin hibrit olduğunu kanıtlamaktadır.

In order to obtain a new thyme cultivars from which thyme oil can be produced more excessively, protoplast fusion was performed between Origanum onites (marble thyme) and Origanum majorana (white thyme) species. CPW + mannitol and CPW + sucrose mix were used successively for protoplast fusion, and CPW + enzyme solution ( 20 % cellulase, 30 % driselase, 15 % pectinase, % 10 ( PEG )) was used successively to mix these protoplasts for fusion. Callus cells formed after one month growth. In order to determine whether cybrid cell group is true hybrid, DNA was isolated from two thyme plants and cybrid cell group and RAPD-PCR analysis was undertaken. Specific DNA bands belonging to two species were detected in cybrid cell group. This result proves hybridity of cybrids after protoplast fusion.